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菌落總數(shù)檢測板5片/包 (4包一盒,20片)
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- 產品簡介
- 產品性能參數(shù)
- 適用范圍
- 服務網點
1、原理及適用范圍
菌落總數(shù)是指樣品經過處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1 mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是常用的微生物檢測項目。菌落總數(shù)檢測板是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品,含有標準的營養(yǎng)培養(yǎng)基,吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色,這樣可縮短計數(shù)時間和增強計數(shù)效果。本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數(shù)的測定。執(zhí)行標準:《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》(GB 4789.2)。
2、操作方法
2.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質袋內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1 mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節(jié)樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,注入含有9 mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。
2.2 接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數(shù)檢測板置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測板內,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3 培養(yǎng):將檢測板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24 h;水產品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃,培養(yǎng)48 h。
3、結果判讀
細菌在檢測板上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數(shù)適中(30~300 CFU)的檢測板進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內,計算兩個檢測板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù),作為每克(或毫升)樣品中菌落總數(shù)結果。
4.2 若有兩個連續(xù)稀釋度的檢測板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內時,按式(1)計算:
················ (1)
式中:
N——樣品中菌落數(shù);
∑C——檢測板上(含適宜范圍菌落數(shù)的測試片)菌落數(shù)之和;
n1——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測板數(shù);
n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測板數(shù);
d——稀釋因子(第一稀釋度)。
示例:
稀釋度 |
1:100(第一稀釋度) |
1:1000(第二稀釋度) |
菌落數(shù) |
232,244 |
33,35 |
上述數(shù)據(jù)經“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
4.3 若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300 CFU,則對稀釋度zui高的檢測板進行計數(shù),其他檢測板可記錄為多不可計,結果按平均菌落數(shù)乘以zui高稀釋倍數(shù)計算。
4.4 若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30 CFU,則應按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.5 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)計算。
4.6 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30 CFU~300 CFU之間,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,則以zui接近30 CFU或300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.7 菌落總數(shù)的報告
4.7.1 菌落總數(shù)在100 CFU以內時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報告。
4.7.2 大于或等于100 CFU時,第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用指數(shù)形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。
4.7.3 若測試片上一片紅色無法計數(shù)時,則報告多不可計。
4.7.4 若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結果無效。
4.7.5 固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。
5、附加說明
5.1 菌落總數(shù)檢測板檢測結果與傳統(tǒng)平板計數(shù)瓊脂平板法符合率可達90%以上。
5.2 磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0 g分析純磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶于500 mL蒸餾水或純凈水中,用大約175 mL的1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液調節(jié)PH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000 mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。
5.3 生理鹽水的配制與滅菌:取8.5 g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000 mL蒸餾水或純凈水中,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。
5.4 注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。zuizuizuizuizuizuizui
1、原理及適用范圍
菌落總數(shù)是指樣品經過處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1 mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是常用的微生物檢測項目。菌落總數(shù)檢測板是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品,含有標準的營養(yǎng)培養(yǎng)基,吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在檢測板上呈紅色,這樣可縮短計數(shù)時間和增強計數(shù)效果。本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數(shù)的測定。執(zhí)行標準:《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》(GB 4789.2)。
2、操作方法
2.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌磷酸緩沖稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質袋內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1 mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節(jié)樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,注入含有9 mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。
2.2 接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數(shù)檢測板置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1 mL樣品勻液滴加到檢測板內,迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3 培養(yǎng):將檢測板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24 h;水產品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃,培養(yǎng)48 h。
3、結果判讀
細菌在檢測板上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數(shù)適中(30~300 CFU)的檢測板進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1 若只有一個稀釋度檢測板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內,計算兩個檢測板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù),作為每克(或毫升)樣品中菌落總數(shù)結果。
4.2 若有兩個連續(xù)稀釋度的檢測板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內時,按式(1)計算:
················ (1)
式中:
N——樣品中菌落數(shù);
∑C——檢測板上(含適宜范圍菌落數(shù)的測試片)菌落數(shù)之和;
n1——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測板數(shù);
n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測板數(shù);
d——稀釋因子(第一稀釋度)。
示例:
稀釋度 |
1:100(第一稀釋度) |
1:1000(第二稀釋度) |
菌落數(shù) |
232,244 |
33,35 |
上述數(shù)據(jù)經“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
4.3 若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300 CFU,則對稀釋度zui高的檢測板進行計數(shù),其他檢測板可記錄為多不可計,結果按平均菌落數(shù)乘以zui高稀釋倍數(shù)計算。
4.4 若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30 CFU,則應按稀釋度zui低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.5 若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)計算。
4.6 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30 CFU~300 CFU之間,其中一部分小于30 CFU或大于300CFU,則以zui接近30 CFU或300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。
4.7 菌落總數(shù)的報告
4.7.1 菌落總數(shù)在100 CFU以內時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報告。
4.7.2 大于或等于100 CFU時,第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用指數(shù)形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。
4.7.3 若測試片上一片紅色無法計數(shù)時,則報告多不可計。
4.7.4 若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結果無效。
4.7.5 固體樣品以CFU/g為單位報告,液體樣品以CFU/mL為單位報告。
5、附加說明
5.1 菌落總數(shù)檢測板檢測結果與傳統(tǒng)平板計數(shù)瓊脂平板法符合率可達90%以上。
5.2 磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0 g分析純磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶于500 mL蒸餾水或純凈水中,用大約175 mL的1 mol/L氫氧化鈉(NaOH)溶液調節(jié)PH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000 mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。
5.3 生理鹽水的配制與滅菌:取8.5 g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000 mL蒸餾水或純凈水中,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15 min,或放入消毒碗柜中消毒。
5.4 注意使用過的檢測板上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。zuizuizuizuizuizuizui
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